TPL_BEEZ2_NAV_VIEW_SEARCH

TPL_BEEZ2_NAVIGATION

Листерия сваб

Гигиенический контроль листерии на поверхности


Особенности и преимущества

Концепция


Листерия сваб создан, чтобы минимизировать риск контаминации рабочей поверхности  и конечной продукции  листериями, преимущественно  L. Monocytogenes. Тест основан на гидролизе листериями эскулина, содержащегося в среде. В результате в среде появляется характерный преципитат черного цвета.

Сваб
Наконечник сваба, используемый в тесте, содержит кальция альгинат. Химический состав наконечника разработан с таким условием, чтобы при погружении в селективную питательную среду он полностью растворялся. За счет этого мы можем обеспечить непосредственный прямой контакт микроорганизмов, собранных во время проведения теста, с селективной средой.

Селективная среда
В Листерия Свабе используется, как основа среда, сходная с селективным  Оксфорд агаром. Тест также основан на гидролизе листериями эскулина. В среде содержатся добавки, ингибирующие рост других бактерий и грибов похожие на добавки в Оксфорд агаре, но более устойчивые.    
В среде в присутствии листерий появляется характерная черно-коричневая преципитация, такая же, как в Оксфорд агаре.
N.B. Некоторые Грам + кокки могут выживать в данной среде, но они не составляют проблемы при определении листерии, так как они медленно растут и не гидролизуют эскулин.

Проведение теста

Чувствительность и специфичность сваб – теста
Листерия Сваб был тестирован в лабораторных условиях путем инокулирования большого количества свабов с разными микроорганизмами, имеющими различное содержание колонеобразующих единиц в образцах (108, 105,103 и 10 КОЕ на сваб).
Образцы были помещены в свабы и росли в течении 72 часов для определения ложно позитивных и ложно негативных результатов.
Результаты представлены в таблице (№1)

Микроорганизмы

КОЕ в образце

изменение цвета

Listeria monocytogenes NCTC 11994

7

черный

Listeria monocytogenes NCTC 5214

19

черный

Listeria monocytogenes NCTC 7973

15

черный

Listeria ivanovii

10

черный

Listeria innocua NCTC 11288

9

черный

Listeria seeligeri

1х104

черный

Listeria Welshimeri NCTC 11857

1х103

черный

Listeria murrayi -

1х105

черный

Listeria grayii

1х105

черный

Staphylococcus aureus NTCT 6571

4х108

без изменения

Streptococcus Faecalis NCTC 775

1,5х105

без изменения

Aeromonas hydrophila NCTC 1767

1,5х107

без изменения

Bacillus subtilis NCTC 10400

4х107

без изменения

Bacillus pumilis NCTC 10327

1х107

без изменения

Bacillus cereus NCTC 10320

2х106

без изменения

Escherichia coli NCTC 9001

1х107

без изменения

Escherichia coli NCTC 10418

6х107

без изменения

Klebsiella pneumoniae

3х107

без изменения

Klebsiella aerogenes NCTC 7418

1х108

без изменения

Klebsiella aerogenes NCTC 11228

3х107

без изменения

Proteus vulgaris  NCTC 1683

1х106

без изменения

Proteus mirabilis NCTC 841

5х108

без изменения

Citrobacter freundii

1,2х108

без изменения

Citrobacter diversus

3х106

без изменения

Enterobacter agglomerans

1,1х108

без изменения

Morganella morganii

1,4х108

без изменения

Serratia liquefacens

1х108

без изменения

Serratia marcescens

1х107

без изменения

Yersinia enterolytica

1х107

без изменения

Enterobacter cloacae

3х107

без изменения

Salmonella typhimurium NCTC 74

3х108

без изменения

Shigella flexneri

8х106

без изменения

Pseudomonas aerugenosa

9х107

без изменения

Pseudomonas putida

1,5х107

без изменения

Pseudomonas flourescens NCTC10038

1х107

без изменения

Pseudomonas maltophillia NCTC 102157

6х107

без изменения

Pseudomonas vesicularis NCTC 10900

4х106

без изменения

Pseudomonas cepacia NCTC 10743

3,5х107

без изменения

Pseudomonas putrefaciens NCTC 10735

3х106

без изменения

Candida albicans

2х106

без изменения

Такая же процедура была выполнена и с использованием различной молочной продукции. Результаты этих тестов соответствуют тем, которые приведены в таблице №1.
Окончательно листерия в различных продуктах питания, была тестирована в сравнении с традиционной методикой определения  (с использованием предселективного и селективного бульона, а затем среды Оксфорд или Палкам). В результате сравнения этих методик была получена 97.2% корреляция результатов, основанных на 197 негативных и 53 позитивных образцах.

Процедура контроля качества
Тестирование селективного агента
Для тестирования используется ряд микроорганизмов (36 микроорганизмов вносятся в минимальной ингибирующей концентрации) включающий:
2 L. Monocytogenes, 1 L. Inocua, 10 Грам +, 20 Грам – и  3 вида дрожжей.

Тестирование окончательного продукта (Листерия Сваба)
Листерия Сваб тестируется используя стандартную тест процедуру
При контроле тестируются микроорганизмы в низкой концентрации 108 -109 КОЕ/ мл, что соответствует стандарту мутности в 0,5 McFarland. Суспензия листерии разводится в 10-3, 10-2 и далее до концентрации . 10 – 102, 103- 104, 105- 106  КОЕ/ мл.

Микроорганизмы, использовавшиеся для процедуры контроля качества

Микроорганизмы

Тип

Listeria monocytogenes

NCTC 11994

Listeria monocytogenes

NCTC 5214

Listeria monocytogenes

NCTC 7973

Listeria innocua

NCTC 11288

Listeria grayii

NCTC 10815

Staphylococcus aureus

NTCT 6571

Staphylococcus aureus


Lactobacillus acidophilus


Klebsiella aerogenes NCTC 11228

NCTC 11228

Все L.  monocytogenes,  L.  innocua, L. ivanovii при тестировании дали изменение цвета во всех разведениях. Только L. grayii (не связанная с человеческими заболеваниями) показывает положительный результат лишь при высокой концентрации. Не листерии не дают позитивных результатов на данной среде (в любой концентрации).

Инструкция по использованию

Тест процедура
1. Снимите обертку и выньте сваб и культуральную тубу.
2. Обработайте свабом исследуемую поверхность (100 см2 , участок 10 х10 см)
3. Снимите колпачок с культуральной тубы и выкиньте его.
4. Всавъте сваб в культуральную тубу и погрузите сваб в питательную среду целиком
5. Произведите контрольную запись на тубе
6. Инкубируйте при 37 0С в течение 48 часов.
7. Интерпретация результатов: Положительный результат, свидетельствующий о наличии листерии, характеризуется изменением цвета агара со светло-коричневого на черный или темно-коричневый. Почернение начинается вокруг наконечника, которым производился забор пробы. Негативный результат – нет изменения цвета.
8. Запишите результаты и утилизируйте тубы.

Стерилизация
Листерия Сваб стерилизуется облучением.

Сроки годности
Срок годности составляет 12 месяцев от даты производства и указан на тубе и упаковке.

Хранение
Листерия Сваб должен храниться в сухом месте при температуре +5 – 250С.
Не замораживать.


Информация в pdf варианте